体外受精の方法

体外受精とは、卵巣より直接成熟卵を採取し（採卵）、同様に採取した精子と一緒にし(受精）、受精した卵子（受精卵）を数日間培養した後、分割した受精卵（胚）を子宮に戻す（胚移植）ことを言います。 　体外受精を成功させるためには良質の成熟卵を採取する必要があるため、排卵誘発剤（HMG・FSH）を使用して卵巣を刺激し、多くの卵子を採取します(調節卵巣刺激)。卵巣を刺激しますと、通常より早く排卵するようになり、自然排卵が起こらないようにする必要があります。

調節卵巣刺激(COH)

質の良い卵子を1回の採卵でより沢山得るのが重要ですが、卵巣刺激に用いるホルモン剤は複数あり、これらをどのように使いこなすかが不妊治療施設の腕の見せ所だと考えています。

卵巣の状態は個々人によって異なりますので、弱い刺激でも過剰に反応してしまう方や、反面強い刺激でもほとんど反応しない方もいらっしゃいます。刺激が強すぎる場合にはOHSS(卵巣過剰刺激症候群)を生じる可能性があり、逆に刺激が効かない場合には採卵は行えません。

大きく分けて以下のようなスケジュールがありますが、AMHや卵巣サイズを参考にスケジュールを組むだけでなく、外来での細かい管理によりその都度個々人に合った調節を可能にしています。

Long法

体外受精を実施する前周期の高温期７日目頃よりGnRHアゴニスト（商品名:ナファレリール）という点鼻薬を開始し、排卵を起こす脳下垂体からのシグナルであるLHサージを抑制することで自然排卵が起きないようにし、月経３日目より排卵誘発剤（HMG/FSH）投与を開始し、適切な卵胞発育に至るまで連日投与します。

Short法

月経開始２日目か３日目よりナファレリール投与を開始し、同じく月経周期の３日目より排卵誘発剤（HMG/FSH）投与を開始し、適切な卵胞発育に至るまで連日投与します。

アンタゴニスト法

排卵を起こすシグナルであるLHサージを防ぐ目的でナファレリールとは違う作用機序のGnRH-アンタゴニスト（製剤名:ガニレスト）という注射を、hCGを投与する２～３日前より使用して自然排卵を防ぎます。卵胞発育の大小不同が起こるのを防ぐため、排卵誘発を行う前周期に経口避妊薬を投与することがあります。排卵誘発剤は同様に月経３日目よりHMG/FSHを開始し、適切な卵胞発育に至るまで連日投与します。主席卵胞径が14mmに達した段階からガニレストの皮下注射を開始し、主席卵胞が18mm以上に達する日まで毎日投与します（通常２～３日間）。同日の夜、hCGを投与して36時間後に採卵します。 

自然排卵周期

自然排卵周期は、卵巣機能が低下した方に実施することが多い方法です。投薬量が少ない為、卵巣やからだにかかる負担が軽くなりますが、卵胞が育たない場合や、排卵してしまうこともあります。

採卵

採卵とは、卵巣から直接成熟卵を取り出すことです。所要時間は約5～15分かかります。局所麻酔のみで行う方法と静脈麻酔で行う方法があり、原則患者様の希望に沿って行います。採卵数が多い場合には疼痛が強くなる可能性があり、静脈麻酔を勧める場合があります。

採卵数は1個から30個以上まで個人差があり、卵胞内に卵子が入っていない場合や、自然排卵が起こってしまった場合は”0”となることがあります。

受精の方法

媒精(IVF)

採卵で得られた卵子を培養液の中で精子と一緒にして受精させる方法です。自然の受精に一番近い方法となりますが、精子の状態が良くない場合には適応になりません。

細胞質内精子注入(ICSI)

顕微授精とは、一個の精子を細いピペットに吸い込んでおき、卵細胞の中に直接精子を卵細胞内に注入する方法です。卵細胞内に直接注入するため、受精は95％以上の人に期待できます。全く動いていない精子や、奇形の精子、また無精子症と診断された人でも精巣(睾丸)から精子を見つけられれば、妊娠は可能です。このように顕微授精（ICSI）によって男性不妊症のほとんどが解決されました。

受精卵の評価

受精後から胚盤胞に至るまで

①初期胚　（受精後から桑実胚まで）

正常に受精した卵子は細胞分裂を繰り返し2→4→8→16…と細胞数を増やしていきます。
細胞数が増えた段階でcompactingという現象が起こり、桑実胚へと進みます。 

②胚盤胞

①の初期胚からさらに分割したものを「胚盤胞」といいます。
その後発達が進むと、透明帯を突き破って抜け出ます。(Hatching)

受精卵の質の評価

Time-lapse Imaging 

従来は培養器に入れた胚をその都度外へ取り出し、顕微鏡で観察し静止画を得て評価していました。現在、当院ではVitrolfe社のTime-lapse technologyを採用しており、より詳細な胚観察を可能にしています。

利点：

  1. 連続した静止画を得ることで、動的解析ができる
  2. 同時に複数の胚の変化を観察することができる
  3. 胚を外へ持ち出す操作が減るため、影響を減らすことができる

例①
複数の胚を同時に観察しています。

例②
初期胚から胚盤胞への理想的な分割を示しています

新鮮胚移植

胚移植とは、胚を子宮内に戻すことです。

採卵後2～3日目に受精卵は分割を始め4～8分割卵(胚)となります。胚や子宮内膜の状態を考慮し医師が判断して、採卵後2日目あるいは3日目に胚を子宮内に戻します。

良質な4～8分割胚を移植しても妊娠に至らない人には、胚を採卵後5日目まで培養して移植することもあります（胚盤胞移植）。

受精卵の凍結　凍結胚移植

胚移植数は原則1個までですので、それ以上の良質胚ができた場合、ご希望があれば凍結保存します。

当院では、超急速ガラス化法（Vitrification法）を用いて凍結をしています。この方法は世界に先駆けて広島HARTクリニックが開発した方法で、極少量の凍結保存液と混和して短時間で急速に凍結します。その結果、妊娠率は従来の胚盤胞凍結法と比べて飛躍的に向上しました。凍結後、融解して胚が生存している率は99.1%以上(2020年)です。
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